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动物医学 胆舒胶囊对卵巢早衰豚鼠HRT治疗后胆囊疾病的预防

2019-05-12 10:16:22来源:论文阁作者:佚名
动物医学导读:【目的】察看胆舒胶囊对卵巢早衰豚鼠激素补充疗法 (HRT) 治疗后胆汁分泌程度的影响, 讨论其对HRT治疗后胆道疾病发作的预防作用。【办法】取动

【目的】察看胆舒胶囊对卵巢早衰豚鼠激素补充疗法 (HRT) 治疗后胆汁分泌程度的影响, 讨论其对HRT治疗后胆道疾病发作的预防作用。【办法】取动情周期稳定的性成熟雌性豚鼠30只随机分为4组:空白对照组 (N=6) , 卵巢早衰组 (N=8) , HRT组 (N=8) , HRT+胆舒胶囊组 (N=8) 。采用环磷酰胺 (CTX) 腹腔注射法复制卵巢早衰豚鼠模型。HRT组给予补佳乐 (剂量为0.3 mg·kg-1·d-1) 灌胃, HRT+胆舒胶囊组给予补佳乐 (剂量为0.3 mg·kg-1·d-1) 、胆舒胶囊 (剂量为0. 45 g·kg-1·d-1) 灌胃, 造模胜利后, 空白对照组、卵巢早衰组给予等量生理盐水灌胃, 连续给药2个性周期, 即32 d。给药完毕后, 采用循环酶法测定胆汁中总胆固醇、总胆汁酸的含量。【结果】与空白对照组比拟, HRT组16、32 d总胆汁酸含量降落, 总胆固醇含量上升 (均P <0.05) ;HRT+胆舒胶囊组32 d总胆汁酸含量上升, 16、32 d总胆固醇含量降落 (均P <0.05) 。【结论】胆舒胶囊可改善HRT所致卵巢早衰豚鼠胆汁成分含量的改动。用药周期越长, 预防效果越明显。

关键词:胆舒胶囊; 激素补充疗法; 卵巢早衰; 总胆汁酸; 总胆固醇; 疾病模型, 动物; 豚鼠;

随着人口老龄化的加剧, 围绝经期女性的人口数目逐年在增加, 我国表现特别突出。我国目前共有1.67亿绝经女性人口, 每年迈入50岁绝经年龄的女性达近1千万, 据数据统计揣测, 到2030年可能到达2.8亿。另外, 除自然绝经外, 随着生活节拍的加快与紊乱, 在环境污染、饮食污染、流产解禁等不良影响的作用下, 卵巢早衰 (premature ovarian failure, POF) 女性人数亦逐年增加, 卵巢功用的衰退亦呈现逐年提早趋向。随着人们对该疾病认识的进步, 激素补充疗法 (hormone replacement therapy, HRT) 开端逐步运用;但研讨标明, 雌激素能够改动胆汁各成分的含量, 使胆固醇含量过高, 胆汁酸含量过低, 易于构成胆固醇结晶, 从而招致胆囊炎以及促进胆囊结石的构成, 胆囊结石又进一步招致胆囊炎重复发作。目前, 鲜少有对HRT所致胆道相关性疾病起预防作用的药物的研讨, 且多是在疾病构成之后再治疗, 因而找到一种运用便当、效果较好、反作用较低的药物来促进胆汁排泄、拮抗HRT对胆汁成分的改动, 从而预防胆道疾病的发作, 是当前临床中面临的问题之一, 也是本研讨的动身点。本研讨以卵巢早衰豚鼠模型为研讨对象, 给予HRT的同时给予胆舒胶囊治疗, 察看胆汁成分的含质变化, 以讨论胆舒胶囊预防HRT致卵巢早衰豚鼠模型发作胆囊疾病的风险。现将研讨结果报道如下。

1 资料与办法

1.1 实验动物

挑选出性成熟且性周期稳定的6周龄雌性豚鼠30只, SPF级, 体质量250~300 g, 购自广东省实验动物中心, 动物质量合格证号:44007200045589。饲养在深圳市康泰生物制品股份有限公司SPF级动物房, 饲养条件:豚鼠每笼4只, 饲养在恒温 (22±2) ℃、恒湿 (45±5) %、人工光照明暗各12 h的饲养室内, 给予规范饲料和自来水, 自在取食饮水。

1.2 药物及配制

胆舒胶囊, 0.45 g/粒, 四川济生堂药业有限公司消费, 消费批号为170444;临床用药量:每次2粒, 每日3次。依据人与动物剂量换算表, 折算其豚鼠等效剂量为0.45 g·kg-1·d-1, 临用前用生理盐水配成90 g/L溶液, 低温保管备用[5]。补佳乐 (戊酸雌二醇片, Progynova) , 每片1mg, DELPHARM Lille S.A.S.企业消费, 消费批号为352A;临床用药量:每次1片, 每天1次。依据人与动物计量换算表, 折算其豚鼠等效剂量为0.3mg·kg-1·d-1, 临用前用生理盐水配成200 mg/L溶液, 低温保管备用。环磷酰胺 (CTX) , 每片50 mg, 通化茂祥制药有限公司消费, 消费批号为170501;临床用药量2~4 mg/kg, 连用10~14 d, 休息1周反复。

1.3 试剂与仪器

甲苯胺蓝染色剂 (1%, 磷酸盐法) 北京索莱宝科技有限公司消费;总胆固醇 (TC) 测定试剂盒, 绍兴市创烨生物科技有限公司消费, 批号:20180110;总胆汁酸 (TBA) 测定试剂盒 (循环酶法) , 由长春汇力生物技术有限公司消费, 批号:2017008。CKX41显微镜 (日本Olympus公司) ;Epoch酶标仪 (美国Bio-Tek公司) 。

1.4 动物分组

取动情周期稳定的性成熟雌性豚鼠30只, 顺应性饲养1周后, 随机分为4组:空白对照组 (N=6) , 卵巢早衰组 (N=8) , HRT组 (N=8) , HRT+胆舒胶囊组 (N=8) 。

1.5 卵巢早衰豚鼠模型的复制

卵巢早衰组、HRT组、HRT+胆舒胶囊组等3组豚鼠均复制卵巢早衰模型。办法:CTX首日负荷剂量为50 mg·kg-1·d-1, 以后连续以8 mg·kg-1·d-1的维持剂量腹腔注射14 d[6]。每天清晨8∶00逐只停止阴道涂片镜检, 用清洁枯燥的小头棉签沾取生理盐水, 一手抓豚鼠, 另一手持棉签悄悄在豚鼠阴道上1/3段侧壁旋转3圈以获得阴道分泌物, 在玻片作平均薄涂片, 用体积分数95%的酒精固定枯燥后用甲苯胺蓝染色, 盖上盖玻片, 可即时停止镜检。当在显微镜下察看到阴道上皮细胞连续7 d处于动情间期, 且造模豚鼠乳腺中止发育, 外阴枯燥萎缩, 随同心情低落或躁动, 则可确认卵巢早衰模型树立胜利, 以证明每组契合实验请求。阴道零落细胞检查原理:阴道上皮细胞随体内性激素程度变化的影响, 而具有周期性的改动, 当体内雌激素程度低时, 即表现为动情间期;卵巢早衰后雌激素程度极度低落时, 显微镜下可见豚鼠阴道零落细胞涂片将不再表现为周期性变化, 而停留在动情间期的以白细胞为主的特征, 此办法直观、烦琐、无创, 可定性判别。

1.6 给药

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